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二抗

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免疫組化試劑盒(抗小鼠二抗)

貨號:G1216

品牌:Servicebio

價格:¥400

規格: 200T

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產品簡介:

  該試劑盒是一個特別敏感的兩步法免疫組化試劑盒,適用于一抗來源為小鼠的抗體。其中二抗為辣根過氧化物酶與山羊抗小鼠IgG結合而成的分子,該分子與小鼠來源一抗(先與抗原反應)結合,結合后的大分子即標記有辣根過氧化物酶,再與DAB反應,得到棕黃色沉淀。由于該系統不含生物素和鏈霉親和素,所以不受內源性生物素干擾,染色背景非常清晰。

包裝內容:

產品貨號 產品名稱 規格
G1216-1 DAB稀釋液 12.5 mL
G1216-2 50×DAB原液 250 μL
G1216-3 HRP標記山羊抗小鼠二抗 100 μL

保存條件:

  整套試劑盒-20℃保存。二抗-20℃保存;DAB稀釋液和50×DAB原液4℃保存;有效期12個月。

使用方法:

  1.常規切片脫蠟至水。

  2.于修復液中修復。一般為Tris-EDTA或檸檬酸修復液。

  3.加過氧化物酶阻斷劑(常用3%過氧化氫)于組織上避光孵育15分鐘。蒸餾水沖洗。

  4.PBS沖洗三次,每次5分鐘。

  5.濃度為3%的BSA(pH7.2-7.4的PBS緩沖液配制)或正常山羊血清工作液于組織上孵育30分鐘,封閉非特異性結合位點。

  6.甩凈封閉液,每張切片加入50-100 μL一抗工作液,4℃過夜。

  7.PBS沖洗三次,每次5分鐘。

  8.每張切片加入50-100 uL二抗工作液(二抗原液G1216-3用pH7.2-7.4的PBST以1:200的比例稀釋),室溫下孵育30-60分鐘。

  9.PBS沖洗三次,每次5分鐘。

  10.DAB工作液配制:每1 mLDAB稀釋液(G1216-1)中加入20μL 50×DAB原液(G1216-2),混勻備用。也可根據試驗結果再適當稀釋后使用。

  11.每張切片加50-100 μL新鮮配制的DAB工作液,室溫下孵育。顯微鏡控制具體顯色時間。

  12.顯色完全后,蒸餾水或自來水沖洗。蘇木素復染,0.1%鹽酸分化,自來水沖洗返藍。

  13.切片經過梯度酒精(70-100%)脫水,二甲苯透明,中性樹膠封片。

注意事項:

  1.如果為冰凍切片或細胞爬片,請將標本固定后自第3步開始。

  2.以上步驟僅供參考,請根據實際情況調整。

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