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染色

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真菌和基底膜染色試劑盒

貨號:G1059

品牌:Servicebio

規格: 50ml*4+2ml+40ml+24ml暫時缺貨

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  產品簡介:

  六胺銀染色法對于觀察腎小球系膜、基底膜的各種形態改變具有極重要的診斷價值,特別是對于觀察膜性腎病基底膜的釘突形成、淀粉樣變性腎病基底膜的雙軌和多軌改變等是其他特殊染色所不可替代的,同時也對各種真菌染色都敏感,存在少量真菌時也容易發現。本染液染色原理是將切片經GDS氧化,腎組織基膜內的多糖和肺組織中的真菌內的多糖化合物被氧化暴露出醛基,游離的醛基還原六銨銀的銀離子成金屬銀而呈黑色。硫代硫酸鈉對已顯色的銀鹽起固定作用,并除去未反應的銀離子。

  包裝內容:

產品貨號 產品名稱 規格
G1059-1 六胺銀(PASM)染液A 50ml
G1059-2 六胺銀(PASM)染液B 50ml
G1059-3 六胺銀(PASM)染液C 2ml
G1059-4 六胺銀(PASM)染液D 40ml
G1059-5 六胺銀(PASM)染液E 24ml
G1059-6 六胺銀(PASM)染液F 50ml
G1059-7 六胺銀(PASM)染液G 50ml

  保存條件:

  常溫保存,有效期6個月。

  使用方法:

  1.石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自來水洗。

  2.切片入六胺銀(PASM)染液A浸泡過夜,水稍洗。

  3.切片入六胺銀(PASM)染液B染色15-20min,蒸餾水快速浸洗3-5次,切片晾干。

  4.工作液配制:將六胺銀(PASM)染液C:六胺銀(PASM)染液D=1:20混合成六胺銀儲備液(現配現用),取六胺銀儲備液20ml,加入蒸餾水15ml,再加入六胺銀(PASM)染液E 2ml,混合均勻,即為工作液。

  5.孵育染色:工作液提前置于60℃烤箱預熱,滴加預熱好的工作液于組織切片上,加蓋孵育(53℃-57℃);

  6.顯色:孵育40min后將切片拿出在鏡下觀察(觀察時工作液不用洗去),腎臟以腎小球毛細血管基膜呈黑色為準,如果著色不夠深,則繼續放入烤箱孵育。以后每隔10min取出切片在鏡下觀察,直至染色結果滿意為止,蒸餾水洗3遍。

  7.六胺銀(PASM)染液F稍處理,蒸餾水洗1遍。

  8.復染(根據需要選做):85%、95%的酒精梯度脫水,切片入六胺銀(PASM)染液G染色20s。

  9.脫水封片:切片依次放入無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-無水乙醇Ⅲ5min-二甲苯Ⅰ5min-二甲苯Ⅱ5min透明,中性樹膠封片。

  10.顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。

  染色結果:

  腎小球囊基膜、腎毛細血管球基膜和腎小管上皮基膜呈黑色,真菌、膠原纖維也呈灰黑色或棕黑色,背景紅色。

  注意事項:

  1.在孵育之前切片必須用蒸餾水清洗干凈,配制六胺銀儲備液和工作液的容器必須洗干凈,否則易出現雜質。

  2.六銨銀儲備液和工作液必須現配現用;

  3.在低倍鏡檢時,菌體不宜著色太黑,否則在高倍鏡下觀察則不夠清皙透亮,在菌體密集成堆的地方顯色更要適當;

  4.腎基膜比真菌等較難顯色,因而在溫箱中作用的時間也較長;腎小管基膜一般比腎毛細血管球基膜顯色早,但應以后者作為標準,腎毛細血管球基膜呈黑色而背景呈淡棕黃色為宜。

  5.染色最好用滴染法好控制染色程度,如果用浸染法所有與試劑接觸的玻璃缸必須用蒸餾水清洗干凈,而且玻片在顯影液中及易出現銀鏡反應使整個玻片變黑很臟影響美觀并且不易控制顯色程度。

  圖例:

  腎小管基膜和腎毛細血管球基膜均呈黑色,背景淺紅。

  肺組織中真菌呈黑色,背景淺紅色。

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